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江苏盐城滨海康达医院PCR实验室

更新时间:2020-11-25

项目地点:江苏


临床基因扩增实验又称PCR实验室, 是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、冠状病毒等感染性疾病的一种检测手段。它可以通过将病毒体内所含的基因进行检测,可以测出普通检验难以检测出的病毒,(测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。)并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,具有检测结果可靠性、准确性和安全性和权威性。


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 设计图纸


一般的PCR实验室实验区包括:试剂准备区、标本制备区、扩增区、产物分析区。各区配套缓冲间及公共走廊。根据使用仪器的功能,实验区可适当合并,例如使用实时荧光PCR仪的,扩增区、扩增产物分析区可合并。《新型冠状病毒肺炎实验室检测技术指南(第四版)》指出,新冠病毒核酸检测方法主要是实时荧光RT-PCR方法,所以用于新冠病毒检测的PCR实验室可以设置为“四区”或者“三区”。各区应设置机械通风系统,并设置缓冲间。各实验区与缓冲间应有一定的压差,保证合理的空气流向,防止交叉污染。


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三区平面图


本项目建筑面积较小,故采用三区设计,合并扩增区和产物分析区。


PCR实验室并没有严格的净化要求,宜采用全送全排的气流组织形式。


气流组织技术说明:

1.PCR实验室暖通设计为全新风全排系统同时也是为了保证PCR实验室压差要求,初中效卫生型新风机组给各区送新风,排风机组分别进行各区的排风,排风后再经过***过滤和组合式外排废气处理装置处理达标后高空排放到大气中,为了避免交叉污染,没有回风,严格控制送排风口风量大小保证各实验区的压力要求。


2.各区送排风机联动启停,先启动排风机后启动送风机,停机先停送风机后停排风机,这样可以完全阻断实验室的污染泄露。


3.各实验区域之间具备单向的气流组织形式,形成单向流程的保护屏障,实验室换气次数宜少于每小时10次。


4.实验室气流组织采用顶送底排,初中效送风,***底排风。


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试剂准备区,该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。因此,该区并不产生污染源,但须确保试剂免受外界污染,如该实验区按《标准》要求相对缓冲间设置为负压,则缓冲间相对走廊需设置为正压。其实,这个区域比较灵活,实验区相对缓冲也可以设置为常压或正压,但缓冲间相对走廊需设置为正压!


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试剂准备区


标本制备区,该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。此区取样时病毒还未灭活,且在取样操作时,容易造成气溶胶扩散。为保护人员安全,必须在生物安全柜内操作,防止标本气溶胶的扩散。此后,标本经过灭活处理,使病毒蛋白不再有生理活性,失去感染、致病和繁殖能力,使操作人员在对样本进行检测时相对安全,但是病毒蛋白的基因序列并没有受到影响。因此,该区为主要污染区域,必须在生物安全柜内操作!要求实验区相对缓冲间设置为负压,缓冲间相对走廊需设置为负压。


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标本制备区


在扩增区和产物分析区,两区域主要分别进行的操作为DNA或cDNA扩增和扩增片段的测定。操作过程中,要防止含病毒核酸的气溶胶通过开门卷吸等途径,扩散出去对试剂与标本造成污染,造成“假阳性”现象。所以核酸扩增室及产物分析区相对缓冲间应呈相对负压状态,缓冲间相对走廊亦需设置为负压。


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走廊


为降低PCR实验室对实验室外部环境和人员带来的风险,内走廊相对实验室外可以保持常压或正压,各区压差可设置为5~10Pa。


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走廊(压差表)


注意事项:

1.PCR实验室每个区应设置压差表监控实验室压差实时情况。


2.为避免交叉污染,进入各个工作区域压差必须严格遵循单一方向流动,即只能从试剂准备区→标本制备区→扩增区→产物分析区流动。


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